植物總RNA提取試劑盒 核酸提取
適用于提取絕大多數植物根、莖、葉、花的總RNA,RNA可直接用于RT, RT-PCR,RT-qPCR,RACE,普通轉錄組測序等。植物總RNA提取試劑盒 核酸提取
植物總 RNA 提取試劑盒
FlashPure Plant Total RNA Mini Kit
植物總RNA提取試劑盒 核酸提取
目錄號:91019
產品內容
產品成份 | 91019-50(50 次) |
裂解液 PRL | 50 ml |
糖酚去除劑 PAD | 5 ml |
去蛋白液 RW1 | 40 ml |
漂洗液 RW | 10 ml(需加入指ding量無水乙醇) |
RNase-Free H2O | 10 ml |
RNA 吸附柱和收集管 | 50 套 |
RNase-Free 1.5ml 離心管 | 50 支 |
RNase-Free 2.0 ml 液氮研磨管 | 50 支 |
保存溫度
室溫(15 ~ 25℃)保存,有效期 12 個月。
產品簡介
適用于提取絕大多數植物根、莖、葉、花的總RNA,RNA可直接用于RT, RT-PCR,RT-qPCR,RACE,普通轉錄組測序等。
本試劑盒是同類產品中適應性zui廣泛,不但可以提取小麥、玉米、水稻、大豆、番茄、煙草、擬南芥等簡單植物,也可以提取茶樹葉片、棉花葉片、葡萄葉片、楊樹葉片、番薯葉片、花生葉片、香蕉葉片、荔枝葉片、白松葉片等多糖多酚含量一般的植物。
如果遇到果實、種子、中草藥,例如:多糖多酚巨高的作物種子(小麥/玉米/大豆/水稻)、葡萄果實、藍莓果實、百合鱗莖、土豆塊莖;或者次級代謝產物巨豐富的葛根、虎杖、雪蓮等藥用植物,請選擇R513-果實種子總RNA提取試劑盒。
產品特點
1. 無毒:免氯仿、免β-巰基乙醇!
2. 高質:28s/18s=2:1,OD260/280=2.0~2.2!
3. 高效:提取全過程僅需20分鐘!
注意事項
a. 自備試劑:無水乙醇。
b. 提取過程使用 RNase-Free 的吸頭;研缽用水che底洗凈,烘箱烘干即可;
c. 樣品加入裂解液PRL勻漿后,可在–80℃保存一個月以上。
d. 取RNA樣本時,把新鮮組織樣本浸入RNAsafe( RNA樣品保存液, 91115-100 ) 中,可在37℃保存一天,在25℃保存一周,在4℃保存一個月,在-20℃或者–80℃長期保存。
具體產品的參數以收到產品說明書的參數為準
操作步驟
提示:所有離心步驟必須在室溫(15 ~37℃)下進行。
第一次使用前,請先在漂洗液 RW 中加入無水乙醇,加入體積詳見標簽
1. 材料處理:
a.取 500 μl 裂解液 PRL,轉入 1.5 ml 離心管中,再加入 50 μl 糖酚去除劑 PAD,混勻備用。
注意:對于幼嫩的農作物葉片等簡單樣本,不加糖酚去除劑 PAD,RNA
的產量可能會提高一些。
b.液氮中研磨適量植物組織成細粉,取≤50 mg 細粉轉入上述裝有裂解液PRL的1.5ml 離心管中,劇烈渦旋震蕩30sec,充分混勻。
(冬天氣溫低,37℃搖床振蕩3min,可增強裂解效果,提高產量)
c.將裂解物13,000rpm離心 5-10 分鐘,沉淀不能裂解的碎片。
注意:使用1ml的裂解液PRL和100μl糖酚去除劑去裂解100mg樣品,RNA產量會翻倍。
2. 小心吸取上清(一般 480 μl,注意不要吸到沉淀)轉入一個新的離心管中,加入 0.5 倍上清體積的無水乙醇(例如:480μl上清,加入240 μl無水乙醇),此時可能出來沉淀,用移液器吹打混勻,不需要離心。
3. 轉移上清混合液至 RNA 吸附柱中,13,000 rpm 離心 2 min,倒棄濾液。
注:吸附柱的容積為 750 μl,如果混合液超過此體積,請分兩次上柱。
4. 加入700μl去蛋白液RW1,室溫放置1min , 13,000rpm離心30sec,倒棄濾液。
5. 加入500μl漂洗液 RW,13,000rpm 離心30sec,倒棄濾液。
6. 重復步驟 5。
7. 將RNA吸附柱放回空收集管中,13,000rpm 離心2min,除去吸附膜上殘留的乙醇。
8. 取出RNA吸附柱,放入 1.5 ml RNase-free離心管中,向RNA吸附膜的中央懸空滴加30~50μl的RNase-free H2O,室溫放置1min,13,000rpm離心 1 min。
9. 提取的RNA可直接用于下游實驗,或于-70℃保存,避免 RNA 降解。
附錄:
一、免液氮直接研磨(自動研磨儀)——適用于新鮮樣本
a. 在2.0ml 液氮研磨管中加入4 mm兩粒,加600μl裂解液 ARL,
放進20 mg左右的樣本,設置65個頻率,震蕩2 min。
b. 將裂解物13,000 rpm 離心3 min,沉淀不能裂解的碎片。
二、液氮研磨(自動研磨儀):
a. 把研磨模塊丟到液氮中預冷,直到沒有氣泡冒出視為預冷完畢。
b. 在2.0 ml液氮研磨管中放入3mm 鋼珠3粒,放進20-30mg樣本,投入液氮中預冷。
c. 把預冷好的離心管插入研磨模塊中,放進研磨儀,設置 55 個頻率, 震蕩 30~60 sec。(以北京赫得研磨儀——京 N9548 為例)
d. 研磨完成后,馬上加600μl裂解液ARL,劇烈渦旋振蕩,充分混勻。
e. 將裂解物 13,000 rpm 離心 3 min,沉淀不能裂解的碎片。
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